　　使用瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等試驗。瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合的DNA硅基質(zhì)材料和*的緩沖液系統(tǒng)，從TAE或TBE瓊脂糖凝膠上回收DNA片段，同時除去蛋白質(zhì)、其他有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。可回收100bp-10kb大小的片段，回收率大于80%。使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶體上的標(biāo)簽。

　　1、瓊脂糖凝膠電泳后，將單一的目的DNA條帶從瓊脂糖凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入干凈的離心管中，稱取重量。

　　2、向膠塊中加入3倍體積溶膠液（如果凝膠重為0.1g，其體積可視為100ul,則加入300ul溶膠液），50-55℃水浴放置10min，期間不斷溫和地上下翻轉(zhuǎn)離心管，以確保膠塊充分溶解。

　　注意：溶膠時，如果溶膠液變?yōu)榧t色（正常情況下為淡黃色），可向含有DNA的膠溶液中加入10-30ul3M醋酸鈉（pH5.2）將膠溶液調(diào)為淡黃色，否則將會影響DNA與吸附柱的結(jié)合，影響回收效率。

　　3、將上一步所得溶液加入一個吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12000rpm離心30-60秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。

　　4、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

　　5、向吸附柱中加入600ul漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。

　　6、12000rpm離心2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數(shù)分鐘，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除，防止漂洗液中的乙醇影響后續(xù)的實驗。

　　7、將吸附柱放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中央懸空滴加適量經(jīng)65℃水浴預(yù)熱的洗脫液，室溫放置2min，

　　12000rpm離心1min。

　　注意：1)、為了增加回收效率，可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中，12000rpm再次離心1min。

　　2)、洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30ul，體積過小影響回收效率。

　　3)、洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響，若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。